电泳技术简介电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。F=QE质点的前移同样要受到阻力(F)的影响,对于一个球形质点,服从Stoke定律,即:F′=6πrην式中r为质点半径,η为介质粘度,ν为质点移动速度,当质点在电场中作稳定运动时:F=F′即QE=6πrην可见,球形质点的迁移率,首先取决于自身状态,即与所带电量成正比,与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外,电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。区带电泳则包括滤纸电泳(常压及高压)、薄层电泳(薄膜及薄板)、凝胶电泳(琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶)等。自由电泳法的发展并不迅速,因为其电泳仪构造复杂、体积庞大,操作要求严格,价格昂贵等。而区带电泳可用各种类型的物质作支持体,其应用比较广泛。本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。影响电泳迁移率的因素⒈电...
发布时间:
2022
-
09
-
10
浏览次数:2312
电泳分析常用方法(一)醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小。它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品,常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液,浓度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要点⑴膜的预处理:必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液,浸透后,取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液,不可吸得过干。⑵加样:样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析,每cm加样线不超过1μl,相当于60-80μg的蛋白质。⑶电泳:可在室温下进行。电压为25V/cm,电流为0.4-0.6mA/cm宽。⑷染色:一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红,糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂,脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。⑸脱色与透明:对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5%醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定,...
发布时间:
2022
-
09
-
09
浏览次数:3132
电泳是指混悬于溶液中的样品(有机的或无机的,有生命的或无生命的)电荷颗粒,在电场影响下向着与自身带相反电荷的电极移动的现象。众所周知,最先进的电脑和最精巧的机器人,也难以和蚂蚁的精巧 程度相比。而且蚂蚁还能传宗接代,更是现代技术所望尘莫及的。而蚂蚁的这些特性与核酸和蛋白质的结构与功能是分不开的。核酸(包括脱氧核糖核酸和核糖核酸)可降解成片段,还可进一步降解成核苷酸;蛋白质(包括酶和同工酶)多肽和氨基酸等都具有可电离的基团,基团在溶液中能吸收或者给出氢离子,从而成为电荷粒子;又由于电荷粒子的多少不等以及具有相同电荷的分子又有大有小,于是在不同的介质中,在电场影响下,它们移动的速度也不相同了。人们利用这种特性,用电泳的方法对上述物质进行定性及定量分析,或者将一定的混合物分离成各个组份以及作少量电泳制备。因为电泳技术的这种独特功能,所以就成了分子生物学研究工作中不可缺少的重要分析手段,被广泛应用于基础理论研究、农业科学、医药卫生、工业生产、国防科研、法医学和商检等许多领域。医学在医院临床检验中,利用电泳技术分析血清中的酶及同工酶,可以诊断肾病的综合征、心绞痛、肝硬化、肝癌、多发生骨髓瘤、恶性肿瘤、乙型肝炎、慢性肝炎等疾病;分析血色素组份,可以判定血细胞的正常与异常;;测定体液中可能存在微生物、原虫的特异性抗原成份,在抗原成份分离的基础上,寻找所需的单克隆抗体等等。刑侦在公安、政法侦审工作...
发布时间:
2022
-
09
-
09
浏览次数:7
在外电场作用下,胶体微粒在分散剂中会向阳极或阴极作定向移动的现象。说明胶体微粒带有电荷。如fe(oh)3胶体微粒带阳电荷,在电场作用下,会向阴极移动。广泛应用于陶瓷工业中黏土的净化,工厂除尘和医院临床诊断等方面。电泳的过程电泳分为以下四个过程:1、电解(分解):在阴极反应最初为电解反应,生成氢气及氢氧根离子OH ,此反应造成阴极面形成一高碱性边界层,当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质,涂膜沉积,方程式为:H2O→OH+H2、电泳动(泳动、迁移):阳离子树脂及H+ 在电场作用下,向阴极移动,而阴离子向阳极移动过程。3、电沉积(析出):在被涂工件表面,阳离子树脂与阴极表面碱性作用,中和而析出不沉积物,沉积于被涂工件上。4、电渗(脱水):涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的,具有多数毛细孔,水被从阴极涂膜中排渗出来,在电场作用下,引起涂膜脱水,而涂膜则吸附于工件表面,而完成整个电泳过程。
发布时间:
2022
-
09
-
09
浏览次数:6890
在外电场作用下,胶体微粒在分散剂中会向阳极或阴极作定向移动的现象。说明胶体微粒带有电荷。如fe(oh)3胶体微粒带阳电荷,在电场作用下,会向阴极移动。广泛应用于陶瓷工业中黏土的净化,工厂除尘和医院临床诊断等方面。电泳的过程电泳分为以下四个过程:1、电解(分解):在阴极反应最初为电解反应,生成氢气及氢氧根离子OH ,此反应造成阴极面形成一高碱性边界层,当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质,涂膜沉积,方程式为:H2O→OH+H2、电泳动(泳动、迁移):阳离子树脂及H+ 在电场作用下,向阴极移动,而阴离子向阳极移动过程。3、电沉积(析出):在被涂工件表面,阳离子树脂与阴极表面碱性作用,中和而析出不沉积物,沉积于被涂工件上。4、电渗(脱水):涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的,具有多数毛细孔,水被从阴极涂膜中排渗出来,在电场作用下,引起涂膜脱水,而涂膜则吸附于工件表面,而完成整个电泳过程。
发布时间:
2022
-
09
-
09
浏览次数:6892
电泳是什么带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。电泳原理电泳是电泳涂料在阴阳两极,施加于电压作用下,带电荷的涂料离子移动到阴极,并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物,沉积于工件表面。它包括四个过程:电解、电泳动、电沉积、电渗。应用1.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳同时具有电荷效应和分子筛效应,可以将分子大小相同而带不同数量电荷的物质分离开,并且还可以将带相同数量电荷而分子大小不同的物质分离开。其分辨率远远高于一般层析方法和电泳方法,可以检出10-9~10-12g的样品,且重复性好,没有电渗作用.2.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可测定蛋白质分子量.其原理是带大量电荷的SDS结合到蛋白质分子上克服了蛋白质分子原有电荷的影响而得到恒定的荷/质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量已经比较成功,此法测定时间短,分辨率高,所需样品量极少(1~100μg),但只适用于球形或基本上呈球形的蛋白质,某些蛋白质不易与SDS结合如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等,此时测定结果就不准确.3.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质定量。电泳后的凝胶经凝胶扫描仪扫描,从而给出定量的结果.凝胶扫描仪主要用于对样品单向电泳后的区带和双向电泳后的斑点进行扫描。4.琼脂或琼脂糖凝胶免疫电泳可用于①检查蛋白质制剂...
发布时间:
2022
-
09
-
08
浏览次数:235
湖南电泳线电泳电泳漆膜具有涂层丰满、均匀、平整、光滑的优点,电泳漆膜的硬度、附着力、耐腐、冲击性能、渗透性能明显优于其它涂装工艺。详细特点:(1)采用水溶性涂料,以水为溶解介质,节省了大量有机溶剂,大大降低了大气污染和环境危害,安全卫生,同时避免了火灾的隐患;(2)涂装效率高,涂料损失小,涂料的利用率可达90%~95%;(3)涂膜厚度均匀,附着力强,涂装质量好,工件各个部位如内层、凹陷、焊缝等处都能获得均匀、平滑的漆膜,解决了其他涂装方法对复 杂形状工件的涂装难题;(4)生产效率高,施工可实现自动化连续生产,大大提高劳动效率;(5)设备复杂,投资费用高,耗电量大,其烘干固化要求的温度较高,涂料、涂装的管理复杂,施工条件严格,并需进行废水处理;(6)只能采用水溶性涂料,在涂装过程中不能改变颜色,涂料贮存过久稳定性不易控制。(7)电泳涂装设备复杂,科技含量较高,适用于颜色固定的生产。
发布时间:
2022
-
09
-
07
浏览次数:3214
2022安全生产月遵守安全生产法 当好第一责任人长沙瑞正涂装科技有限公司根据国家、省、市以及宁乡经开区关于第21个全国“安全生产月”活动部署,聚焦“遵守安全生产法 当好第一责任人”主题,结合公司实际,特制定2022年“安全生产月”活动安全生产月安全责任重于泰山。营造浓厚的安全生产氛围,有利于更好推动经济社会发展。提高全社会整体安全水平,就要加强安全教育,把安全发展理念根植到每个人心里。组织专题培训加大检查和处理力度建立健全双重预防体系安全宣誓活动,集体签名,合影学习贯彻相关国家安全政策文件和精神扎实做好安全生产工作公司安全部提出希望每一名员工都能够守牢安全生产红线底线,圆满达成工作目标,谱写出新的辉煌!涂装 宣誓 合影电泳 设备 喷粉 弹簧我们是光荣的瑞正人,安全生产是我们神圣的职责。为了自己和他人的安全,为了家庭的幸福,为了企业的发展,我郑重宣誓:时刻注意安全,认真按章作业!遵守安全法规,履行安全职责!严守规章制度,提高安全技能!消灭“三违”现象,保证“四不”伤害;拒绝违章,查处隐患;爱生命,坚守红线,坚持从我做起,确保安全生产,争做瑞正安全人!电泳 设备 喷粉 弹簧安全生产月历年主题安全规程系生命,自觉遵守是保障。未来,让我们紧绷安全弦,继续以实干的精神、拼搏的激情、进取的意志创造更加骄人的成绩,开创更加美好的未来!温馨...
发布时间:
2022
-
06
-
06
浏览次数:817
党员战“疫”疫情常态化防控不松懈疫情尚未结束,当前国际疫情十分严峻,国内疫情呈现点多、面广、频发的特点。在疫情防控中,“抗击疫情,党员优先””抗击疫情,党员优先“这是共产党员先进性的生动体现。我们常说,”喊破嗓子,不如做出样子“。一名党员就是一面旗帜,一名党员就是一个突击手。疾风知劲草,烈火炼真金。在防控肺炎疫情的工作中,瑞正党支部干部不畏艰险,冲锋在前,勇挑重担,用无私品格、坚强意志和奉献精神,再次彰显了党员本色,传递了抗疫力量!疫情就是命令,防控就是责任图为刘书记团结带领大家坚决贯彻落实决策部署,全面贯彻”坚定信心、同舟共济、科学防治、精准施策“的要求,做到守土有责、守土担责、守土尽责充分发挥了支部战斗堡垒和党员先锋模范作用加强组织领导。召开党支部会议,专题研究公司疫情防控工作,成立疫情防控领导小组,由刘合东书记任组长,其他党员李小贞、彭冬辉、李敏、洪贵妹、预备党员、李凤姣、流动党员王相、积极份子殷俊、王相、刘放为成员,明确具体工作职责,制定《公司疫情应对处置预案》,确保第一时间快速响应。党员战“疫”疫情尚未结束,当前国际疫情十分严峻,国内疫情呈现点多、面广、频发的特点。在疫情防控中,我们每一位市民都是自己健康的第一责任人,做好个人防护,主动配合防疫,能让我们远离疫病,也能让我们的城市常保平安、健康。了解奥密克戎四大谜团当前国际疫情十分严峻,国内疫情呈现点多、面广、频发的特点。...
发布时间:
2022
-
05
-
08
浏览次数:813